基因工程

• 1、

  限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（）

• 2、

  生物工程的上游技术是（）

• 3、

  基因工程操作的三大基本元件是：（I供体II受体III载体IV抗体V配体）（）

• 4、

  多聚接头（Polylinker）指的是（）

• 5、

  下列五个DNA片段中含有回文结构的是（）

• 6、

  下列有关连接反应的叙述，错误的是（）

• 7、

  T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（）

• 8、

  载体的功能是（I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力）

• 9、

  克隆菌扩增的目的是（I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因）（）

• 10、

  下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是（）

• 11、

  考斯质粒（cosmid）是一种（）

• 12、

  某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度

• 13、

  外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解I

• 14、

  提高重组率的方法包括（I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反

• 15、

  识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为（）

• 16、

  pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（）

• 17、

  λ噬菌体外包装目的基因片段的大小应为（）

• 18、

  DNA连接酶的功能是（）

• 19、

  PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（）

• 20、

  下列属于获取目的基因的方法的是（） ①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取

• 21、

  的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是（）

• 22、

  哪项不是基因表达载体的组成部分（）

• 23、

  下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法（）

• 24、

  不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）

• 25、

  有关基因工程的叙述中，错误的是（）

• 26、

  基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（　）

• 27、

  下列获取目的基因的方法中需要模板链是（）

• 28、

  在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显白色，为阳性克隆，未插入基因的

• 29、

  同尾酶

• 30、

  柯斯（C0S）质粒

• 31、

  SD序列

• 32、

  质粒不亲和性

• 33、

  cDNA文库

• 34、

  穿梭质粒载体

• 35、

  目的基因（objective gene）

• 36、

  双功能抗体

• 37、

  基因工程操作的三大基本元件是（）I供体；II受体；III载体；IV抗体；V配体

• 38、

  根据当今生命科学理论，基因工程的用途是（） I分离纯化基因；II大量生产生物分子；III构建新型物种

• 39、

  根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是（）

• 40、

  基因工程的单元操作顺序是（）

• 41、

  下列有关基因的叙述，错误的是（）

• 42、

  天然 PstI 限制性内切酶的来源是 （）

• 43、

  下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是（）

• 44、

  带有多个不同种复制起始区的质粒是（）

• 45、

  下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是（）

• 46、

  目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是（）

• 47、

  若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入（）

• 48、

  质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（）①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质

• 49、

  双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于（）

• 50、

  下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是（） I限制性酶切；IIPCR扩增；III抗药性筛选

• 51、

  鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（）

• 52、

  cDNA第一链合成所需的引物是（）

• 53、

  TaqDNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能，这是因为（）

• 54、

  构建基因文库一般使用的载体是（） I质粒；IIλ-DNA；IIICosmid

• 55、

  强化基因转录的元件是（）

• 56、

  启动子的特征之一是（）

• 57、

  下列基因调控元件中属于反式调控元件的是（）

• 58、

  包涵体是一种（）

• 59、

  外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（） I融合基因能稳定扩增；II融合蛋白能抗蛋白酶的

• 60、

  第二代基因工程是指（）

• 61、

  基因工程菌中重组质粒的丢失机制是（）

• 62、

  利用毛细管作用原理，将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术

• 63、

  在翻译过程中．mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。在原核生物中，mRNA分子上有两个核

• 64、

  识别顺序相同但切割位点不同者称（）酶，识别顺序与切割方式均相同者称（）酶，来源与识别顺序均不同，但切

• 65、

  受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许有

• 66、

  在翻译过程中，mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。在原核生物中，mRNA分子上有两个核

• 67、

  基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系称为（）。

• 68、

  用火药爆炸或者__气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的植物组织或者细胞中，这一

• 69、

  基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些？

• 70、

  什么是限制性核酸内切酶？第二型限制酶有何特点？

• 71、

  分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些？

• 72、

  小批量碱变性提取质粒DNA的原理与基本过程如何？

• 73、

  什么是基因文库？基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别？

• 74、

  琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么？

• 75、

  什么是原位杂交技术？其基本过程如何？

• 76、

  什么是SD序列？

• 77、

  为什么用原核表达系统表达真核生物的蛋白质时，克隆的真核基因不能来自基因组文库？真核基因应如何获得？

• 78、

  如何提高真核基因在原核宿主中的表达效率？

• 79、

  什么是基因诊断？基因诊断中常用的方法有哪些？试简述其中一种方法的原理。

• 80、

  基因探针（probe）

• 81、

  基因芯片（gene chip）

• 82、

  简述包含体形成的原因和包含体蛋白复性的主要步骤。

• 83、

  同裂酶（同切点酶）

• 84、

  限制性核酸内切酶

• 85、

  星号活性

• 86、

  限制性片段长度多态性（RFLP）

• 87、

  基因工程的定义与特征。

• 88、

  试述基因工程的主要研究内容。

• 89、

  基因工程在食品工业上有何应用发展？

• 90、

  转基因是一把双刃剑，请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。

• 91、

  原核生物和真核生物的基因表达调控有何差别？

• 92、

  什么是基因？根据基因的产物，基因可分为哪三类？

• 93、

  引起核酸变性的因素主要有哪些？核酸变性后性质有何变化？

• 94、

  DNA凝胶电泳中核酸分子分离的机理。

• 95、

  Southern杂交一般过程及影响杂交因素。

• 96、

  一般质粒DNA的构型有哪几种？在琼脂糖凝胶电泳中的有何特点？

• 97、

  碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素。

• 98、

  电泳缓冲液使用一定时间后出现DNA在凝胶中跑不动现象的原因，有何解决办法？

• 99、

  电泳的指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么？

• 100、

  简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。

• 101、

  基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些？

• 102、

  重组体分子的选择方法主要有哪些？并简单阐述其原理。

• 103、

  下列各组专业术语中，含义最为接近的是（）

• 104、

  根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成（）

• 105、

  T4-D、NA、连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段D、NA、片段连接在一起，其底物的关键基团是（）

• 106、

  某一重组D、NA、（6.2kB）的载体部分有两个SmA、I酶切位点。用SmA、I酶切后凝胶电泳上出现

• 107、

  CDNA、法获得目的基因的优点是（）

• 108、

  Southern blotting:Southern印迹

• 109、

  Cosmid vector:黏粒载体

• 110、

  cDNA library:cDNA文库

• 111、

  RACE

• 112、

  Probe：探针

• 113、

  RT-PCR：逆转录PCR

• 114、

  S-D Sequence:S-D序列

• 115、

  Shuttle plasmid vector:穿梭质粒载体

• 116、

  MCS

• 117、

  理想质粒载体的必备条件？

• 118、

  核酸操作的基本技术有哪些？

• 119、

  影响核酸保存的关键因素是什么？怎样保存核酸制品？

• 120、

  合成cDNA第二链的主要策略有哪些？

• 121、

  基因工程诞生的理论基础是什么？

• 122、

  PCR技术主要应用在哪些领域？

• 123、

  试述5′RACE技术原理和方法。

• 124、

  什么是包涵体？

• 125、

  什么是α-互补筛选？

• 126、

  限制性核酸内切酶的活性受哪些因素影响？

• 127、

  如何有效地提高外源基因的表达效率？

• 128、

  试述载体构建一般方法

• 129、

  大肠杆菌作为基因工程受体菌的优缺点是什么？

• 130、

  生物工程的下游技术是（）

• 131、

  基因工程操作常用的酶是：（I内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶）（）

• 132、

  限制性内切核酸酶的星活性是指（）

• 133、

  关于cDNA的不正确的提法是（）

• 134、

  黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）

• 135、

  下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？（）

• 136、

  某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点。用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子

• 137、

  下列哪一种酶作用时需要引物？（）

• 138、

  用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。

• 139、

  说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。

• 140、

  影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些？

• 141、

  YAC载体具有什么样的功能性DNA序列？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？

• 142、

  列举质粒载体必须具备的4个基本特性。

• 143、

  PCR的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？

• 144、

  cDNA克隆与基因组克隆有何不同？

• 145、

  怎样将一个平末端DNA片段插入到Eco RI限制位点中去？

• 146、

  什么是Western印迹？它与Southern印迹有什么不同？

• 147、

  什么是蓝白斑筛选法？

• 148、

  黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。

• 149、

  什么是同聚物加尾连接法？用何种方法加尾？具有哪些优缺点？

• 150、

  何谓接头连接法？